Yüksek sıcaklıklarda enzimlerin yapısı bozulduğu için kimyasal olayların hızı yavaşlar. Bu yüzden enzimlerin en iyi çalışma sıcaklık aralığı 35-37 derecedir. Enzimler düşük sıcaklıklardan etkilenmezler. Ayrıca enzim miktarı arttıkça reaksiyon hızıda da artar. Madde miktarı arttığı zaman ise olayın hızıda artar ama sonra sabit kalır. Su olmadan enzimler çalışamazlar. Enzimlerin en iyi çalıştıkları pH 7’dir. Aktivatör madde enzimlerin hızını arttırır, inhibitör madde ise enzimlerin hızını yavaşlatır.